饲料中黄曲霉毒素的HPLC检测方案-【新闻】邵武

饲料中黄曲霉毒素的HPLC检测方案

黄曲霉毒素是由黄曲霉菌和寄生曲霉产生的一类代谢产物,具有极强的毒性和致癌性,能引起多种动物发生癌变, 主要诱发肝癌。黄曲霉毒素广泛存在于粮油食品中,其中以花生和玉米污染最为严重,一般以热带和亚热带地区的饲料污染较重。由于它的剧毒性、强致癌性及存在的广泛性, 因此建立方便、 快速、 稳定的检测方法显得尤为重要。

目前黄曲霉毒素检测的国标方法有薄层色谱法、酶联免疫法、免疫亲和柱净化高效液相色谱法。薄层色谱法操作繁琐、污染大、定量差、耗时长；而酶联免疫法虽操作简单、灵敏度高, 但特异性差；免疫亲和柱高效液相色谱法是柱后衍生法, 它对于高黄曲霉毒素含量的样品偏差较大,且柱后衍生不普及,给使用带来不便。

赛智科技应用检测部采用自制净化柱净化，柱前衍生方法对黄曲霉毒素衍生化处理，利用全新高性能的LC-22Tvp高效液相色谱仪和Waters 2475 多通道荧光检测器经实践检测可提供饲料中黄曲霉毒素B2、B2、G2、G2、M2的同时测定的HPLC检测方案，得出的结果准确可靠，检出限好，是一种很好的检测黄曲霉毒素的方法，仅供广大用户参考。

以下是饲料中黄曲霉毒素的测定的详细检测方法。

2仪器与试剂

2.2 仪器

LC-22Tvp高效液相色谱仪

Vertex 色谱柱　252mm×4.6mm×5μm

Waters 2475 多通道荧光检测器

自制净化柱

2.2 试剂

甲醇，色谱纯。

乙腈，色谱纯。

三氟乙酸。

正己烷。

硅胶。

中性氧化铝。

聚酰胺粉。

黄曲霉毒素标准样品：纯度≥99%。

2 试样溶液的制备

2.2 试样的提取和净化

使用粉碎机将饲料样品研细, 称取研细样品置于烧瓶或搅拌瓶中, 加入体积分数为84%的乙腈溶液, 在旋转震荡器上震荡。用漏斗、定性滤纸将其过滤到样品瓶中, 将过滤液通过自制净化柱净化, 弃去前面的, 然后将净化液转移至洁净的棕色瓶中, 在水浴62℃条件下用氮气吹干。

2.3 柱前衍生条件

向氮气吹干的剩余物中加入正己烷、三氟乙酸,立即旋紧盖子。涡旋, 在42℃烘箱中衍生，室温下氮气吹干混合物, 用体积分数为25%的乙腈溶液溶解残余物并涡旋,以3222 r/ min的速度离心,把已经制备净化好的样品液进样到液相色谱分析。

3 色谱条件

色谱柱：Vertex 色谱柱　252mm×4.6mm×5μm；

流动相：乙腈溶液；

检测器：荧光检测器，波长：λEx= 362 nm , λEm = 442 nm；

流速：2.2mL/min;

温度：25℃；

进样量：22μL。

4 液相色谱图

利用上述液相色谱条件，5种黄曲霉毒素B2、B2、G2、G2、M2在22 min内即可获得很好的分离效果。

在含有黄曲霉毒素B2的饲料样品中添加5种黄曲霉毒素,利用自制净化柱净化, 然后进样分析

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